I 简介
I型鼠尾胶原是重要的细胞外基质,可促进细胞贴壁、维持细胞分化状态。我们的产品是从SD大鼠尾腱中提取分离,在万级实验室中经过多道工序提纯获得的,保持了胶原蛋白的生物活性。经测试,可用于多种原代细胞的细胞培养,例如肝细胞、血管内皮细胞、间充质干细胞、胰岛beta等细胞。
II 试剂与耗材
—胶原母液(本产品Cat: LV-collagen001)
—超纯水
—醋酸母液
—0.22μm滤膜及50mL一次性注射器
—移液枪及枪头
—培养板/皿/瓶
—生物安全柜
—37℃/5%CO2培养箱
III 包被步骤
1.在生物安全柜中 ,将5mL 醋酸母液加入到1L无菌水中配制成为醋酸工作液。
2.加入I型鼠尾胶原母液,使终浓度为50μg/mL,即每100 mL醋酸工作液中加入5 mg胶原蛋白(对应胶原母液体积为V=5mg/10mg/mL=0.5mL),4℃保存待用(不超过3个月)。
3.将胶原工作液以大于/等于5μg/cm2的包被量加入到需要包被处理的培养板/皿/瓶中,通常情况下,加入工作液为推荐培养基(见附表)使用体积的60%,如12孔板的培养基推荐使用体积为 1mL,加入0.6 mL胶原工作液即可达到饱和。
4.生物安全柜中,常温孵育1h。延长包被时间至3小时,对后续细胞培养没有影响。
5.将胶原工作液吸出,生物安全柜中自然晾干,封口膜封口,4℃保存不超过6个月。
6.接种细胞前,胶原包被培养板/皿/瓶需PBS或培养基清洗一次,以去除残留的醋酸。
IⅤ特殊说明
1.本产品为冷藏发货,收货后可能为部分液体或者液体状态(确保仍然低温),属于正常状态。
2.I型鼠尾胶原母液储存在-20℃。避免多次冻融,建议根据需求量进行分装后冻存。
3.本产品为无菌液体,请放心使用,无需过滤。
4.胶原工作液可重复利用2-3次,但需避免因多次包被而造成可能的污染,如怀疑存在污染,请立即放弃使用。
附表.培养板/皿/瓶参数与液体加入推荐量
培养板 | 培养面积(cm2) | 高度(带盖mm) | 推荐培养液量/ mL |
6W | 9.5 | 23 | 2 |
12W | 3.6 | 23 | 1 |
24W | 1.9 | 23 | 0.5 |
48W | 0.88 | 23 | 0.3 |
96/96U/96V | 0.32 | 16 | 0.1 |
384W | 0.1135 | 16 | 0.033 |
35mm | 8.5 | 12 | 2 |
60mm | 22.9 | 15 | 5 |
100mm | 57.6 | 20 | 10 |
150mm | 150.1 | 25 | 25-30 |
T25 | 25 | 20 | 5 |
T75 | 75 | 35 | 10 |
T175 | 175 | 40 | 30 |
VI 关于售后
如您发现产品有任何质量问题,请您收集原始数据,并第一时间联系公司销售或者技术支持,公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同,操作人员习惯不同,熟练程度不一样,实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限,公司不做售后,请老师理解与支持。
IⅤ 联系方式
公司电话:0755-28284050
技术支持:19902901483(周博士)