运输方式
液氮运输
1、吸附式液氮运输，无游离液氮，冒白烟即说明正常。
2、温度监测设备严密监控运输过程中的罐内温度，如发现异常可拷贝温度记录仪上的PDF和excel数据（温度监测设备一头可拔掉，显示USB接头，插入电脑即可拷贝数据，如遇到困难，可联系销售人员和技术支持解决）。
3、合金密码锁，保证从发出到收货，没有第三方可以打开液氮罐接触细胞，保护细胞安全。
4、GPS定位器，细胞运输轨迹全程掌握，防止丢件。
5、液氮罐、温度监测设备、合金密码锁、GPS定位器为回收部件，请妥善保管，禁止破坏，否则会被拉入黑名单。
文章引用
略
适用范围
肾小管上皮细胞用于研究急慢性肾病（如急性肾损伤、慢性肾病）机制、药物肾毒性评估、肾纤维化进程、细胞再生修复机制，以及代谢紊乱（如糖尿病肾病）和信号通路（如TGF-β、Wnt）调控，并作为疾病模型和药物筛选平台。
II 试剂与材料
Ø 冻存原代肾皮质细胞（Cat# LV-PRC001/2/3/4）
Ø 肾皮质细胞培养基（DMEM/F12+10%FBS+1%P/S）
Ø 胶原包被培养瓶（LV-coated）
Ø 无菌15ml离心管
Ø 一次性移液管
Ø 37℃/5%CO2培养箱
Ø 移液枪
Ø 恒温水浴锅（37℃预热）
Ø 水平离心机（带水平转子，可离心15ml离心管）
Ø 生物安全柜
Ø 宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头，再灭菌使用）
Ø 75%酒精
Ø 0.25%胰酶
Ø PBS
重要提示：解冻时，冻存细胞转移必须使用液
氮转移；在整个复苏实验过程中必须全程使用
宽口枪头。
III 细胞的复苏与铺板
1.原代肾皮质细胞培养基放入37℃恒温水浴锅中充分预热，分出其中10ml加入到15ml离心管中并置于37℃水浴锅中充分预热15min。。
2.将冻存的细胞从冷藏位置经液氮迅速转移至37℃恒温水浴锅中。将冻存管尽可能多的浸入37℃水中，顺时针水平摇动，但必须确保冻存管管盖保持在水
面以上。
3.解冻冻存管约90~120s，至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
4.用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜。
5.用宽口枪头将肾皮质细胞重悬（轻轻吹打2次），并将细胞悬液逐滴加入含有10mL 预热的肾皮质细胞培养基的15ml离心管中（注意：冻存管与枪头上残留细胞，可用1ml肾皮质细胞培养基润洗冻存管与枪头）。
6.盖上盖子，将离心管轻微上下颠倒3次混匀。500g，常温离心5min，去上清并用培养基重悬。
7.沉淀的细胞用肾皮质细胞培养基重悬并定容至4ml，用台盼蓝排除法测定细胞的活力和细胞总量。
8.将细胞按2×10^4cells/cm2接种至胶原包被培养瓶中。摇匀，在37℃/5%CO2培养箱中培养，48h后换液。
IV 肾皮质细胞培养与传代
1.肾皮质细胞铺板培养5天左右，细胞融合度达到90%时可进行传代。
2.提前将培养基、PBS、胰酶放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入生物安全柜内。
3.吸除旧培养液，加少量PBS润洗细胞，适量胰酶，使加入的胰酶能盖住细胞，37℃孵育，约2~3min显微镜下观察。
4.待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液（控制吹打的力度，避免产生大量的气泡）。
5.500g，常温离心5min，去上清并用肾皮质细胞培养基重悬。
6.将细胞悬液按2×10^4cells/cm2接种到新的胶原包被培养瓶内，置37℃/5%CO2培养箱中培养，隔天观察贴壁生长情况。
7.肾皮质细胞体外传代代数≤15代，其中人肾皮质细胞代数≤9代。
细胞可以冻存，按照常规细胞系冻存方法进行。
V 关于售后
如您发现产品有任何质量问题，请您收集原始数据，并第一时间联系公司销售或者技术支持，公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同，操作人员习惯不同，熟练程度不一样，实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限，公司不做售后，请老师理解与支持。
售后有效期与提供的原始数据：
复苏问题：立刻报告异常；提供台盼蓝染色或者AO/PI染色。
污染问题：复苏72小时以内；提供相差显微镜照片。
纯度问题：一个月内；提供免疫荧光或者流式结果。
VI 联系电话
公司电话：0755-28284050
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