科研产品

运输方式

液氮运输

1、吸附式液氮运输，无游离液氮，冒白烟即说明正常。

2、温度监测设备严密监控运输过程中的罐内温度，如发现异常可拷贝温度记录仪上的PDF和excel数据（温度监测设备一头可拔掉，显示USB接头，插入电脑即可拷贝数据，如遇到困难，可联系销售人员和技术支持解决）。

3、合金密码锁，保证从发出到收货，没有第三方可以打开液氮罐接触细胞，保护细胞安全。

4、GPS定位器，细胞运输轨迹全程掌握，防止丢件。

5、液氮罐、温度监测设备、合金密码锁、GPS定位器为回收部件，请妥善保管，禁止破坏，否则会被拉入黑名单。

文章引用

略

适用范围

肝星形细胞（HSCs）在科研领域具有重要价值，其用途可总结为以下核心方向：

1. 肝纤维化与肝硬化机制研究

HSCs是肝纤维化的核心效应细胞。在病理状态下，HSCs被激活并转化为肌成纤维细胞，分泌大量胶原蛋白等细胞外基质（ECM），驱动纤维化进程。研究者通过体外培养激活的HSCs（如LX-2细胞系）或构建基因敲除模型（如PLVAP敲除小鼠），分析其分泌的细胞因子（如TGF-β、IL-6）、ECM成分变化及信号通路（如AKT磷酸化），以揭示纤维化分子机制和潜在治疗靶点。此外，HSCs的收缩性研究还可解释肝窦高压的形成机制。

2. 代谢调控与能量平衡研究

HSCs通过特定蛋白（如PLVAP）调控肝脏代谢底物偏好。例如，禁食状态下，HSCs的PLVAP蛋白通过影响脂肪酸酯化和氧化，决定肝脏优先利用脂肪酸还是碳水化合物。敲除PLVAP的小鼠显示糖代谢能力增强，胰岛素信号通路激活，这为代谢性疾病（如糖尿病、脂肪肝）的研究提供了新视角。此外，HSCs储存维生素A的特性也被用于脂溶性维生素代谢相关研究。

3. 肝再生与细胞间相互作用模型

HSCs分泌生长因子（如HGF、VEGF）促进肝细胞增殖和血管生成，在肝损伤修复中发挥双重作用。科研中常通过共培养系统（如HSCs与肝细胞、肝祖细胞）模拟再生微环境，分析HSCs对肝细胞功能（如白蛋白分泌、药物代谢酶活性）的影响。此类模型还可用于探究HSCs与免疫细胞（如巨噬细胞）的互作机制，解析炎症与再生平衡。

4. 药物开发与抗纤维化治疗筛选

永生化HSCs细胞系（如LX-2、HSC-Li）是抗纤维化药物筛选的重要工具。研究者通过体外评估药物对HSCs增殖、α-SMA表达及胶原分泌的抑制作用，或结合动物模型验证其疗效。例如，靶向HSCs激活通路（如TGF-β/Smad、PDGF受体）的小分子抑制剂或基因疗法已进入临床前研究阶段。

5. 肿瘤微环境与癌症进展研究

激活的HSCs通过分泌基质金属蛋白酶（MMPs）和炎症因子，参与肝癌微环境的重塑及肿瘤细胞侵袭转移。科研中常利用HSCs与肝癌细胞共培养模型，研究其对肿瘤生长、血管生成及免疫逃逸的调控作用，为肝癌治疗提供新策略。

由于我司产品说明书半年更新一次，以下步骤仅作参考，以公司随货说明书为准

II  试剂与材料

Ø 肝星形细胞（Cat# LV-HSC001/2/3/4）              

Ø 复苏培养基（Cat#LV-Rec001）

Ø 肝星形细胞培养基（Cat# LV-HSCM001）

Ø 胶原包被板/皿/瓶（Cat# LV-Coated）                                            

Ø 无菌15ml离心管

Ø 一次性移液管                                    

Ø 37℃/5%CO₂培养箱     

Ø 移液枪                                      

Ø 恒温水浴锅（37℃预热）

Ø 冷冻水平离心机（带水平转子，可离心15ml离心管）        

Ø 生物安全柜

Ø 宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头，再灭菌使用）

Ø 75%酒精

重要提示：解冻时，冻存细胞转移必须使用液氮转移；在整个复苏实验过程中必须全程使用宽口枪头。

III 细胞的复苏与铺板

1. 复苏培养基放入37℃水浴锅中充分预热，铺板培养基放入37℃恒温水浴锅中充分预热。

2. 将冻存的肝星形细胞从冷藏位置经液氮迅速转移至37℃恒温水浴锅中，尽可能多的浸入37℃水中，

1. 顺时针水平摇动，但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。

2. 解冻冻存管约90~120s，至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。

3. 用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜。

4. 用宽口枪头将细胞重悬（轻轻吹打2次），并转移至含10ml预热培养基的15ml离心管中（注意：冻存管与枪头上残留细胞，可用1ml复苏培养基清洗冻存管与枪头）。

5. 将细胞悬液逐滴加入预热复苏培养基，每1ml细胞悬液加入10ml复苏培养基（注意：前3ml要缓慢逐滴加入并轻微摇晃，后面7ml可加快速度），最后轻微上下颠倒1次混匀。

6. 600g，4℃离心5min，去上清并用培养基重悬。

7. 沉淀的细胞用肝星形细胞培养基重悬并定容至4ml，用台盼蓝排除法测定细胞的活力和细胞总量。

8. 将细胞按3×10⁴cells/cm²接种至胶原包被培养板中，摇匀，置37℃/ 5% CO₂培养箱中培养，24小时后换液。

IV 细胞培养与传代

1. 细胞融合度达到80%时可进行传代。

2. 提前将培养基、PBS、胰酶放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入生物安全柜内。

3. 吸除旧培养液，加少量PBS润洗细胞，弃PBS后加适量胰酶，使加入的胰酶能盖住细胞，37℃孵育，约2~3min后显微镜下观察。

4. 待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞板，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液（控制吹打的力度，避免产生大量的气泡）。

5. 600g，室温离心5min，去上清并用培养基重悬。

6. 将细胞悬液按3×10⁴cells/cm²接种到新的胶原包被培养瓶/板内，置37℃/ 5% CO₂培养箱中培养，隔天观察贴壁生长情况。

细胞复苏后不可再冻存

V 关于售后

如您发现产品有任何质量问题，请您收集原始数据，并第一时间联系公司销售或者技术支持，公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同，操作人员习惯不同，熟练程度不一样，实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限，公司不做售后，请老师理解与支持。

售后有效期与提供的原始数据：

复苏问题：立刻报告异常；提供台盼蓝染色或者AO/PI染色。

污染问题：复苏96小时以内；提供相差显微镜照片。

纯度问题：一个月内；提供免疫荧光或者流式结果。

VI 联系电话

公司电话：0755-28284050

技术支持：19902901483（周博士）