科研产品

犬PBMC

产品名称:犬PBMC

货号:LV-PBMC005

规格:10/20million/管

品系:比格犬

供体数:单供体或者多供体

货期:1周

保存条件:严格液氮储存,注意温度监测,特别是液氮罐来回复温可能影响复苏效果

运输条件:液氮运输

产品有效期:10年

质检项目:复苏数据(活率、活细胞数、污染物检测)、悬浮效果等。

产品信息
培养步骤
冻存处理
售后规定

 产品详情

细胞货号规格单位品系供体数税点运输条件保藏条件
犬PBMCLV-PBMC005-1010million/管比格犬单供体或者多供体3.00%液氮运输液氮储存
犬PBMCLV-PBMC005-2020million/管比格犬单供体或者多供体3.00%液氮运输液氮储存


运输方式

液氮运输

1、吸附式液氮运输,无游离液氮,冒白烟即说明正常。

2、温度监测设备严密监控运输过程中的罐内温度,如发现异常可拷贝温度记录仪上的PDF和excel数据(温度监测设备一头可拔掉,显示USB接头,插入电脑即可拷贝数据,如遇到困难,可联系销售人员和技术支持解决)。

3、合金密码锁,保证从发出到收货,没有第三方可以打开液氮罐接触细胞,保护细胞安全。

4、GPS定位器,细胞运输轨迹全程掌握,防止丢件。

5、液氮罐、温度监测设备、合金密码锁、GPS定位器为回收部件,请妥善保管,禁止破坏,否则会被拉入黑名单。

文章引用

适用范围

外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMC)是免疫系统研究的重要工具,其科研用途广泛,涵盖基础医学、临床研究和药物开发等多个领域。以下是其核心科研用途的总结:

1. 免疫治疗与肿瘤研究

PBMC在免疫治疗药物研发中占据核心地位,主要用于评估免疫细胞(如T细胞、NK细胞)对肿瘤的杀伤能力。例如:

免疫共培养杀伤平台:通过PBMC与肿瘤细胞共培养,结合流式细胞术(如CSFE标记靶细胞、CD45标记效应细胞)定量分析免疫细胞的特异性杀伤效果,用于CAR-T疗法、免疫检查点抑制剂的开发与优化。

NK细胞扩增与应用:从PBMC中分离并扩增高活性NK细胞,用于癌症免疫治疗研究及药物筛选,尤其在实体瘤和血液肿瘤的体外模型中应用广泛。

2. 疾病机制与生物标志物研究

PBMC为解析疾病机制提供了关键细胞模型:

心血管疾病:通过检测PBMC中自噬相关蛋白(如LC3、Beclin 1)的表达水平,研究急性心肌梗死患者的病理机制及治疗靶点。

代谢性疾病:分析PBMC的脂质代谢相关通路(如STAT3),揭示非酒精性脂肪肝(NAFLD)等疾病的分子机制。

炎症与感染:研究PBMC在病毒(如HIV、HBV)感染中的免疫应答,或作为脓毒症等炎症性疾病的生物标志物来源。

3. 药物开发与代谢评估

PBMC在药物研发中用于药效评估、毒性测试及代谢研究:

体外代谢模型:结合肝微粒体、CYP450酶等工具,评估药物在PBMC中的Ⅰ相和Ⅱ相代谢稳定性,优化药物设计。

药物筛选平台:利用PBMC-肿瘤共培养系统,筛选靶向免疫调节或抗肿瘤活性的候选化合物,例如小分子抑制剂或纳米药物。

毒性评估:检测药物或环境毒素对PBMC的激活状态(如炎症因子释放、氧化应激反应),预测肝损伤等副作用。

4. 再生医学与个性化医疗

PBMC在细胞治疗和疾病模型构建中具有潜力:

iPS细胞重编程:利用冷冻保存的PBMC快速构建患者特异性iPS细胞系,用于疾病建模(如遗传性疾病)及个性化药物测试。

类器官与器官芯片:将PBMC衍生的免疫细胞整合到肝脏或肿瘤类器官中,模拟免疫微环境,研究免疫细胞与实质细胞的互作机制。

5. 跨学科与转化医学应用

肠-肝轴研究:通过PBMC分析肠道菌群代谢物(如LPS)对肝脏免疫的影响,解析肠源性肝病的发病机制。

单细胞组学分析:结合单细胞测序技术,解析PBMC中淋巴细胞、单核细胞的异质性,揭示疾病特异性免疫细胞亚群。

总结

PBMC的科研用途覆盖免疫治疗、疾病机制解析、药物开发、再生医学及跨学科研究,其多功能性使其成为连接基础研究与临床转化的重要桥梁。未来,随着单细胞技术和类器官模型的发展,PBMC在精准医疗和个体化治疗中的应用将进一步扩展。

由于我司产品说明书半年更新一次,以下步骤仅作参考,以公司随货说明书为准

 

试剂与材料

Ø PBMCCat# LV-PBMC001/2/3

Ø 37℃恒温水浴锅

Ø 生物安全柜

Ø 15ml离心管

Ø 37℃/5% CO2培养箱

Ø 宽口滴管和宽口移液枪头

Ø 移液枪

Ø 75%酒精


II 完全RPMI1640培养基

成分

用量

不完全RPMI1640溶液

500ml

左旋谷氨酰胺(L-Glu

2mM

2-巯基乙醇(2-ME

50μM

青霉素(Penicillin)

100U/ml

链霉素(Streptomycin)

100μg/ml

FCS56℃灭活30min

50ml

特别提醒:复苏培养基中补加300mM葡萄糖,可提升细胞活力及活细胞数。


III 细胞的复苏与铺板

重要提示:解冻时,冻存细胞转移必须使用液氮转移;在整个复苏实验过程中必须全程使用宽口枪头。

1. 生物安全柜中,10ml300mM葡萄糖的完全RPMI1640培养基加入到15ml离心管中,37℃恒温水浴锅预热10min,然后转移到生物安全柜中;完全RPMI1640培养基放入37℃恒温水浴锅中让其充分预热

2. 将冻存的PBMC从冷藏位置迅速转移至37℃恒温水浴锅中。将冻存管尽可能多的浸入37℃水中,作规律的水平摇动,但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。

3. 解冻冻存管至刚好完全溶解成液体,约60-120秒。

4. 75%酒精对冻存管消毒,并将其转移到生物安全柜。

5. 将解冻后的细胞轻轻吹打混匀2次,将细胞混匀后小心吸出,并以滴加方式转移至含已预热的复苏培养基的离心管中(注意:冻存管与枪头上残留细胞,可吸取1ml复苏培养基清洗冻存管与枪头并将其混入离心管的培养基中),轻微上下颠倒离心管2-3次混匀。

6. 离心力650g,升速7,降速4,离心5min

7. 弃上清(倾倒去上清,保留底部残余液体,减少细胞损失),加入6-10ml完全RPMI1640培养基重悬细胞,并用台盼蓝染色和血球计数板计数V细胞悬液V0.4%台盼蓝=91细胞活率使用血球计数板手工计数,勿用细胞计数仪;细胞总数使用细胞计数仪计数测定细胞的活力、细胞建议细胞总数检测3次,求取平均值;为节约时间,细胞活率检测1

8. 根据计数结果,按实验需求铺板。

9. 37/ 5% CO2培养箱中培养。


细胞复苏后不可再冻存,再冻存可能影响细胞的功能。

I关于售后

如您发现产品有任何质量问题,请您收集原始数据,并第一时间联系公司销售或者技术支持,公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同,操作人员习惯不同,熟练程度不一样,实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限,公司不做售后,请老师理解与支持。

售后有效期与提供的原始数据:

复苏问题:立刻报告异常;提供台盼蓝染色或者AO/PI染色。

污染问题:复苏96小时以内;提供相差显微镜照片。

纯度问题:一个月内;提供免疫荧光或者流式结果。

V 联系电话

公司电话:0755-28284050

技术支持:19902901483(周博士)

细胞培养指南