运输方式
液氮运输
1、吸附式液氮运输,无游离液氮,冒白烟即说明正常。
2、温度监测设备严密监控运输过程中的罐内温度,如发现异常可拷贝温度记录仪上的PDF和excel数据(温度监测设备一头可拔掉,显示USB接头,插入电脑即可拷贝数据,如遇到困难,可联系销售人员和技术支持解决)。
3、合金密码锁,保证从发出到收货,没有第三方可以打开液氮罐接触细胞,保护细胞安全。
4、GPS定位器,细胞运输轨迹全程掌握,防止丢件。
5、液氮罐、温度监测设备、合金密码锁、GPS定位器为回收部件,请妥善保管,禁止破坏,否则会被拉入黑名单。
文章引用
略
适用范围
人CD19阳性B细胞的科研用途可概括为以下核心方向:
1. CAR-T免疫治疗开发
CD19是B细胞恶性肿瘤(如急性淋巴细胞白血病、大B细胞淋巴瘤)的关键靶点。通过基因工程改造患者T细胞,使其表达CD19特异性嵌合抗原受体(CAR-T),可精准清除CD19阳性肿瘤细胞,成为复发/难治性血液瘤的重要治疗手段。目前全球已批准多款CD19 CAR-T疗法,如Yescarta、Breyanzi等,临床试验显示其完全缓解率可达40%-60%。
2. 基础免疫学与疾病机制研究
B细胞功能分析:通过CD19磁珠分选技术富集CD19+ B细胞,研究其免疫球蛋白分泌(如IgE合成)、趋化性及信号通路(如BCR依赖的Ca²⁺调控)。
恶性转化机制:CD19在B细胞发育早期至淋巴瘤阶段持续表达,其与CD21、CD81的复合物参与B细胞活化与增殖调控,是研究白血病和淋巴瘤发病机制的关键靶标。
3. 自身免疫病与免疫调控
CD19靶向疗法(如单抗Uplizna)已用于视神经脊髓炎等自身免疫性疾病的治疗。此外,CD19+调节性B细胞(Breg)的免疫抑制功能研究为红斑狼疮、多发性硬化症等疾病提供了潜在干预策略。
4. 药物递送系统开发
工程化CD19+浆细胞可长期分泌双特异性抗体(如抗CD19/CD3),在小鼠模型中有效杀伤白血病细胞,且单次输注即可维持药物浓度,显著优于传统持续输注方案。此类研究为长效生物制剂递送提供了新思路。
5. 诊断与预后评估
CD19表达水平是B细胞恶性肿瘤(如ALL、DLBCL)的诊断标志物,其动态监测可评估CAR-T疗效及复发风险。例如,治疗前CD19阳性率需≥5%才符合CAR-T治疗入选标准。
总结
CD19阳性B细胞的科研用途聚焦于肿瘤免疫治疗、疾病机制解析、免疫调控及药物开发,其作为靶点或工具细胞在基础研究与临床转化中均发挥核心作用。未来方向包括优化CAR-T安全性(如减少神经毒性)、开发双靶点疗法及拓展自身免疫病适应症。
I 试剂与材料
Ø 冻存CD19阳性B细胞(Cat# LV-Bcell001/002)
Ø 培养基(完全RPMI1640,见下表)
Ø 37℃恒温水浴锅
Ø 生物安全柜
Ø 15ml离心管
Ø 37℃/5% CO2培养箱
Ø 宽口滴管和宽口移液枪头
Ø 移液枪
Ø 75%酒精
II 完全RPMI1640培养基
成分 | 用量 |
不完全RPMI1640溶液 | 500ml |
左旋谷氨酰胺(L-Glu) | 2mM |
2-巯基乙醇(2-ME) | 50μM |
青霉素(Penicillin) | 100U/ml |
链霉素(Streptomycin) | 100μg/ml |
FCS(56℃灭活30min) | 50ml |
特别提醒:复苏培养基中补加300mM葡萄糖,可提升细胞活力及活细胞数。
III 细胞的复苏与铺板
重要提示:解冻时,冻存细胞转移必须使用液氮转移;在整个复苏实验过程中必须全程使用宽口枪头。
1. 完全RPMI1640培养基放入37℃恒温水浴锅中让其充分预热。
2. 将冻存的细胞从冷藏位置迅速转移至37℃恒温水浴锅中。将冻存管尽可能多的浸入37℃水中,作规律的水平摇动,但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。
3. 解冻冻存管至刚好完全溶解成液体,约90-120秒,。
4. 用75%酒精对冻存管消毒,并将其转移到生物安全柜。
5. 小心地将解冻后的细胞吸出,移至15ml离心管,并用培养基润洗一遍冻存管及吸取细胞的枪头。
6. 一边摇晃离心管,一边加入完全RPMI1640培养基至12ml(注意:前3ml要缓慢逐滴加入并摇晃,后面9ml可加快速度),最后上下颠倒混匀。
7. 20℃,650g,升速7,降速4,离心5min。
8. 弃上清,加入3ml完全RPMI1640培养基重悬细胞,并用台盼蓝染色计数(V细胞悬液:V0.4%台盼蓝=9:1,细胞活率使用血球计数板手工计数,勿用细胞计数仪;细胞总数使用细胞计数仪计数)测定细胞的活力、细胞总数,建议细胞总数检测3次,求取平均值;为节约时间,细胞活率检测1次。
9. 按实验要求的密度进行铺板。
10. 在37℃/ 5% CO2培养箱中培养。
细胞复苏后不能再冻存,再冻存影响细胞功能和状态。
IV 关于售后
如您发现产品有任何质量问题,请您收集原始数据,并第一时间联系公司销售或者技术支持,公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同,操作人员习惯不同,熟练程度不一样,实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限,公司不做售后,请老师理解与支持。
售后有效期与提供的原始数据:
复苏问题:立刻报告异常;提供台盼蓝染色或者AO/PI染色。
污染问题:复苏96小时以内;提供相差显微镜照片。
纯度问题:一个月内;提供免疫荧光或者流式结果。
V 联系电话
公司电话:0755-28284050
技术支持:19902901483(周博士)