运输方式
液氮运输
1、吸附式液氮运输，无游离液氮，冒白烟即说明正常。
2、温度监测设备严密监控运输过程中的罐内温度，如发现异常可拷贝温度记录仪上的PDF和excel数据（温度监测设备一头可拔掉，显示USB接头，插入电脑即可拷贝数据，如遇到困难，可联系销售人员和技术支持解决）。
3、合金密码锁，保证从发出到收货，没有第三方可以打开液氮罐接触细胞，保护细胞安全。
4、GPS定位器，细胞运输轨迹全程掌握，防止丢件。
5、液氮罐、温度监测设备、合金密码锁、GPS定位器为回收部件，请妥善保管，禁止破坏，否则会被拉入黑名单。
文章引用
略
适用范围
肝Kupffer细胞是肝脏中最重要的巨噬细胞群体，占全身定居巨噬细胞的80%-90%，其在科研领域的用途广泛，主要涉及以下方向：
1. 肝纤维化与肝硬化机制研究
Kupffer细胞通过分泌促炎因子（如TNF-α、IL-1β、TGF-β）激活肝星形细胞（HSCs），驱动纤维化进程。
M1/M2表型调控：M1型促进纤维化（分泌促炎因子和促纤维化因子），M2型则参与纤维化消退（通过分泌抗炎因子和降解细胞外基质）。
代谢重编程：研究其糖酵解、脂肪酸氧化等代谢途径对极化的影响，为靶向代谢的抗纤维化治疗提供依据。
2. 肝癌微环境与肿瘤进展研究
Kupffer细胞在肝癌发生、发展中具有双重作用：
抗肿瘤功能：通过吞噬肿瘤细胞、分泌细胞毒性因子抑制肿瘤生长；肝癌组织中Kupffer细胞数量减少与肿瘤恶化相关。
促肿瘤机制：活化的Kupffer细胞通过分泌VEGF等促血管生成因子，重塑肿瘤微环境，支持肝癌细胞侵袭转移。
3. 免疫调节与炎症平衡
免疫耐受：通过清除抗原-抗体复合物、调控T细胞活性，维持肝脏免疫稳态，但也可能导致病毒持续感染或肿瘤免疫逃逸。
炎症调控：在酒精性肝病、非酒精性脂肪肝等疾病中，Kupffer细胞通过分泌IL-10等抗炎因子抑制过度炎症反应。
4. 药物开发与毒性评估
抗纤维化药物筛选：利用永生化Kupffer细胞系（如大鼠/人原代细胞）评估药物对M1/M2极化、胶原分泌的调控效果。
纳米药物靶向：研究其清道夫受体（如Stabilin-1/2）对纳米颗粒的清除机制，优化药物递送系统以避开非特异性摄取。
5. 代谢性疾病与跨器官互作
脂质代谢研究：Kupffer细胞通过STAT3等通路调控肝脏脂质沉积，与非酒精性脂肪肝（NAFLD）的发病机制密切相关。
肠-肝轴作用：处理肠道来源的LPS等代谢物，参与肠道菌群对肝病的影响。
总结
Kupffer细胞的科研用途覆盖肝病机制（纤维化、肝癌）、免疫调控、药物开发及代谢研究等多个领域，其功能异质性和代谢可塑性为疾病治疗提供了新靶点。例如，靶向M1/M2极化或代谢通路可能成为抗纤维化或抗肿瘤的新策略。实验模型（如原代细胞培养、基因编辑动物）和单细胞组学技术将进一步推动其机制解析。
由于我司产品说明书半年更新一次，以下步骤仅作参考，以公司随货说明书为准
II 试剂与材料
Ø 肝Kupffer细胞（Cat# LV- Kup001/2/3/4）
Ø 肝Kupffer细胞培养基（Cat# LV-KuPM001）
Ø 培养板（TC-treated）
Ø 无菌15ml离心管
Ø 一次性移液管
Ø 37℃/5%CO2培养箱
Ø 移液枪
Ø 恒温水浴锅（37℃预热）
Ø 冷冻水平离心机（带水平转子，可离心15ml离心管）
Ø 生物安全柜
Ø 宽口移液枪头
Ø 75%酒精
重要提示：解冻时，冻存细胞转移必须使用液氮转移；在整个复苏实验过程中必须全程使用宽口枪头。
III 细胞的复苏与铺板
1. 肝Kupffer细胞培养基放入37℃恒温水浴锅中充分预热。
2. 将冻存的肝Kupffer细胞从冷藏位置通过液氮迅速转移至37℃恒温水浴锅中。将冻存管尽可能多的浸入37℃水中，顺时针水平摇动，但必须确保冻存管管盖保持在水面以上。
3. 解冻冻存管约90~120s，至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
4. 用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜。
5. 用宽口枪头将细胞重悬（轻轻吹打2次），并转移至含10ml预热培养基的15ml离心管中（注意：冻存管与枪头上残留细胞，可用1ml复苏培养基润洗冻存管与枪头）。
6. 将细胞逐滴加入预热培养基中，最后轻微上下颠倒3次混匀。
7. 600g，4℃离心5min，去上清并用培养基重悬。
8. 沉淀的细胞用肝Kupffer细胞培养基重悬并定容至4ml，用台盼蓝排除法测定细胞的活力和细胞总量。
9. 将细胞按3×104cells/cm2接种至TC处理培养板中。摇匀，在37℃/5%CO2培养箱中培养，24h后换液。
IV 细胞培养与传代
1. 细胞融合度达到80%时可进行传代。
2. 提前将培养基、PBS、胰酶放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
3. 吸除旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使加入的胰酶能盖住细胞，37℃孵育，约2~3min后显微镜下观察。
4. 待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞板，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液（控制吹打的力度，避免产生大量的气泡）。
5. 600g，室温离心5min，去上清并用肝Kupffer细胞培养基重悬。
6. 将细胞悬液按3×104cells/cm2接种到新的TC处理培养瓶/板内，置37℃/5%CO2培养箱中培养，隔天观察贴壁生长情况。
细胞复苏后不可再冻存
V 关于售后
如您发现产品有任何质量问题，请您收集原始数据，并第一时间联系公司销售或者技术支持，公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同，操作人员习惯不同，熟练程度不一样，实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限，公司不做售后，请老师理解与支持。
售后有效期与提供的原始数据：
复苏问题：立刻报告异常；提供台盼蓝染色或者AO/PI染色。
污染问题：复苏96小时以内；提供相差显微镜照片。
纯度问题：一个月内；提供免疫荧光或者流式结果。
VI 联系电话
公司电话：0755-28284050
技术支持：19902901483（周博士）
