I 简介
种属 人
生长特性 贴壁(上皮细胞样)
培养条件 培养基:90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培养环境 37℃,5%CO2,95%AIR
换液周期 2-3天
传代:
1.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3-1:4;
2.用75%酒精喷洒整个TC处理培养瓶消毒,将其平躺至于生物安全柜中,待酒精干后,打开瓶口,将TC处理瓶中培养基吸干净;
3.加3-4ml常温PBS轻轻润洗细胞,吸走PBS,可根据细胞背景干净程度决定是否需要润洗两次;
4.TC处理培养瓶加1ml左右已经37℃预热的胰酶,轻轻晃动培养瓶以使酶均匀覆盖瓶底细胞层;
5.将培养瓶放入37℃培养箱消化;
6.第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化,消化好后加入2-3ml完全培养基终止消化;
7.用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,300g常温离心5min,弃上清;
8.加入新完全培养基重悬细胞,均匀分到新的培养瓶进行传代培养。
冻存液配方:45%完全培养基+45%FBS+10%DMSO
1.消化并进行细胞计数,离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经标记好的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80℃冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4℃静置5-10min,在-20℃静置2h后转入-80℃过夜,第二天转入液氮保存。
VI 关于售后
如您发现产品有任何质量问题,请您收集原始数据,并第一时间联系公司销售或者技术支持,公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同,操作人员习惯不同,熟练程度不一样,实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限,公司不做售后,请老师理解与支持。
售后有效期与提供的原始数据:
复苏问题:立刻报告异常;提供台盼蓝染色或者AO/PI染色。
污染问题:复苏96小时以内;提供相差显微镜照片。
纯度问题:一个月内;提供免疫荧光或者流式结果。
VII 联系电话
公司电话:0755-28284050
技术支持:19902901483(周博士)